苏云金芽孢杆菌伴孢晶体的纯化主要是将其从细胞碎片,残留不溶性培养基及芽抱中分离出来,残留不溶性培养基可以通过纱布过滤和低速离心除去,然后高速离心除去细胞碎片,这样可以除去一部分杂质方便后面的分离。
双水相体系是一个复杂的体系,影响因素有以下:
PGE的分子量。该因素是*重要的影响因素,随着PEG分子量的增加,其疏水性增强,因而影响到蛋白质分子在两相间得分配。据报到,改变PEG的分子量和浓度,细褪在系中的分配系数改变了六次方。
另一个影响因素是比例,低比例更有利于晶体分配到下相。上样量也会影响到分配情况。因此实验将上样量固定在5%(w/w)。
对双水相体系来说,孢子散在整个上相,而晶体层集中到上相的底端,尽管孢子的密度大于晶体,但由于晶体的菱形,所受到的阻力比抱子小,因而沉降速度更大。